Agar Nutritivo

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Agar Nutritivo:

Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el aislamiento de microorganismos y recuento de microorganismos con escasos  requerimientos nutricionales.

Su uso está descrito en procedimientos para el análisis de alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria.

Descripción

Agar Nutritivo

APLICACIÓN Y USO DEL AGAR NUTRITIVO

Medio de cultivo no selectivo; utilizado para el cultivo de bacterias y para el recuento de organismos en agua, alcantarillado, heces y otros materiales.

 

COMPONENTES DEL AGAR NUTRITIVO

    • Peptona
    • Extracto de carne
    • Extracto de levadura
    • Cloruro de Sodio
  • Agar liofilizado

 

CONTENIDO ESTUCHE DEL AGAR NUTRITIVO

  • Unidad, paquete por 10 placas.

 

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:

  • Mechero.
  • Asas bacteriológicas.
  • Elementos de protección.
  • Incubadora.
  • Cepas ATCC.

 

METODOLOGÍA:

  • Principio del método:

Medio de cultivo no selectivo. Por las características de sus componentes es un medio usado para el cultivo de microorganismos poco exigentes en sus requerimientos nutricionales. No contiene inhibidores del desarrollo bacteriano. La peptona y el extracto de carne son las fuentes de carbono y nitrógeno para el desarrollo bacteriano.  El agregado de cloruro de sodio permite el enriquecimiento con sangre de carnero u otras sustancias para facilitar el cultivo de microorganismos exigentes, manteniendo el balance osmótico y el agar es el agente solidificante.

Puede ser suplementado con sangre ovina desfibrinada estéril para favorecer el crecimiento de microorganismos exigentes en sus requerimientos nutricionales y permite una clara visualización de las reacciones de hemólisis.

  • Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Medio de cultivo para el aislamiento de microorganismos poco exigentes en procedimientos de análisis de alimentos, aguas y otros de importancia sanitaria.

 

  • Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para ser usado.

  • Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos:

El medio de cultivo debe ser conservado a una temperatura de 2-8°C, en su empaque original, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio.

Almacenar las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación caiga sobre la superficie del medio.

 

  • Espécimen o muestra

Se aplica para todo tipo de bacterias, para uso clínico, industrial o investigativo.

  • Procedimiento:
  1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
  2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
  3. Tener asa estéril para la toma de muestra.
  4. Sembrar suavemente sobre la superficie del producto.
  5. Incubar las placas entre 35 – 37°C en posición invertida, durante 18-24-48-72-120 horas, según las técnicas implementadas por cada laboratorio.
  6. Dependiendo de las exigencias del microorganismo almacenar en la atmósfera adecuada.
  7. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

 

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:

 

CONTROL DE CALIDAD DEL AGAR NUTRITIVO

  • Prueba Macroscópica: 

Apariencia: Medio de cultivo semisólido de color amarillo ligeramente opalescente.

pH final: 7.4 ± 0.2 (25°C).

Volumen: 19 mL ±.

 

  • Prueba de esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35 – 37°C.

 

  • Prueba de efectividad: La prueba se debe realizar con un control negativo y uno positivo. La efectividad del medio se controla mediante el cultivo de cepas control ATCC de:

 

Microorganismos Cepa Crecimiento
Staphylococcus aereus ATCC 29213 Satisfactorio.          Colonia blanca
Candida albicans  ATCC 14053 Satisfactorio.                  Colonia blanca
Escherichia coli  ATCC 25922 Satisfactorio

 

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL AGAR NUTRITIVO

  • Para uso de diagnóstico in vitro.
  • Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
  • Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas.
  • El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución.

 

TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:

  • APS One.
  • Cabina de flujo laminar.
  • Master Clave.
  • Autoclave.
  • Incubadora.

 

BIBLIOGRAFÍA

  • MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Baltmore, Md.
  • Insberg, H.D. (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook, vol. I. American Society for Microbiology, Washington, D.C.5.
  • Baron,E.J., L.R. Peterson, and S.M. Finegold. 1994. Bailey Scot´s diagnostic microbiology, 9th ed. Mosby-Year Book, Inc. St. Louis, M.o.
  • Downes and Ito (ed.). 2001. Compendium of methods for the mi crobiological examination of foods, 4th ed. American Public Health Association, Washington, D.C.

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