Agar Mueller Hinton

Descripción

Agar Mueller Hinton

APLICACIÓN Y USO DEL AGAR MUELLER HINTON

Medio estándar utilizado para la prueba de sensibilidad de bacterias aerobias de rápido crecimiento o anaerobias facultativas.

 

COMPONENTES DEL AGAR MUELLER HINTON

• Extracto de Carne bovina.
• Ácido Hidrolizado de Caseína.
• Almidón.
• Agar liofilizado.

 

CONTENIDO ESTUCHE DEL AGAR MUELLER HINTON

• Unidad, paquete por 10 placas.

 

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:

• Mechero de Bunsen.
• Asas bacteriológicas.
• Elementos de protección.
• Incubadora a 35 – 37°C.
• Guantes. 
• Cepas ATCC.

 

METODOLOGÍA:

• Principio del método:

Medio de cultivo nutritivo no selectivo que promueve el desarrollo microbiano, para ser utilizado en forma rutinaria en la realización del antibiograma en medio sólido, debido a que presenta buena reproducibilidad lote a lote en las pruebas de sensibilidad. Su contenido de inhibidores de sulfonamidas trimetoprima y tetraciclina es bajo, la mayoría de los patógenos microbianos crecen satisfactoriamente.

En comparación con los métodos anteriores, que utilizaban discos con concentraciones altas y bajas de agentes antimicrobianos, y que basan su interpretación en la presencia o ausencia de zonas de inhibición, este método utiliza discos con una sola concentración de agente antimicrobiano y los diámetros de zona presentan una correlación con las concentraciones mínimas inhibitorias (CMI).

 

• Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Utilizado para prueba de sensibilidad a los antimicrobianos.

 

• Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para ser usado.

 

• Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos: 

El medio de cultivo debe ser conservado a una temperatura de 2-8°C, en su empaque original, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio.

Almacenar las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación caiga sobre la superficie del medio.

 

• Espécimen o muestra:

Prueba de susceptibilidad a antibióticos, para uso clínico, industrial o investigativo.

 

• Procedimiento:

1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
3. Tener asa estéril para la toma de muestra.
4. Sembrar suavemente sobre la superficie del producto.
5. Incubar las placas a 35 – 37°C en posición invertida, entre 18-24-48-72-120 horas, según las técnicas implementadas por cada laboratorio.
6. Dependiendo de las exigencias del microorganismo almacenar en la atmósfera adecuada.
7. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

 

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:

CONTROL DE CALIDAD DEL AGAR MUELLER HINTON

• Prueba Macroscópica: 

• Apariencia: Medio de cultivo semisólido de color beige.

• pH final: 7.3 ± 0.2 (25°C).

• Volumen: 20 mL ±.

• Prueba de esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35 – 37°C.
• Prueba de efectividad: La efectividad del medio se controla mediante el cultivo de cepas con el siguiente control ATCC de:

Microorganismos	Cepa	Crecimiento
Staphylococcus aureus	ATCC 29213	Satisfactorio y patron de susceptibilidad correcto
Escherichia coli	ATCC 25922	Satisfactorio y patron de susceptibilidad correcto
Enterococcus faecalis	ATCC 29212	Satisfactorio y patron de susceptibilidad correcto

 

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL AGAR MUELLER HINTON

• Para uso de diagnóstico in vitro.
• Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
• Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas.
• El desecho del medio de cultivo se debe realizar según los protocolos implementados por cada institución.

 

TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:

• APS One.
• Cabina de flujo laminar.
• Master Clave.
• Autoclave.
• Cepario.

 

BIBLIOGRAFÍA:

• Bauer, Kirby, Sherris and Turck. 1966. Am. J. Clin. Pathol. 45:493. Isenberg (ed.). 1992. Clinical Microbiology Procedures Handbook, volume 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
• MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identificationmaintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
• Mueller J. H. and Hinton J., 1941, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 48:330.
• National Committee for Clinical Laboratory Standards, 2000, Approved Standard: M7-A5. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria that grow aerobically, 5th Ed., NCCLS, Wayne, Pa. 
• NCCLS Approved Standard: ASM-2, 1979, Performance Standards for Antimicrobic disc Susceptibility Tests, 2nd Ed., National Committee for Clin. Lab. Standards.