Medio Mínimo Esencial Estéril

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Medio Mínimo Esencial Estéril es un medio de cultivo que contiene los nutrientes mínimos indispensables para el crecimiento de una colonia, por lo general sin la presencia de aminoácidos y son a menudo utilizado por los microbiólogos y genetistas para cultivar microorganismos de tipo salvaje.

Descripción

MEDIO MINIMO ESENCIAL

APLICACIÓN Y USO MEDIO MINIMO ESENCIAL ESTERIL

Es un medio de cultivo que contiene los nutrientes mínimos indispensables para el
crecimiento de una colonia, por lo general sin la presencia de aminoácidos y son a menudo utilizado por los microbiólogos y genetistas para cultivar microorganismos de tipo salvaje.

COMPONENTES DEL MEDIO MINIMO ESENCIAL

Aminoácidos:
• Glicina.
• Clorhidrato de L-arginina.
• L-cistina 2HCl.
• L-glutamina.
• L-histidina clorhidrato – H2O.
• L-isoleucina.
• L-leucina.
• Clorhidrato de L-lisina.
• L-metionina.
• L-fenilalanina.

• L-serina.
• L-treonina.
• L-triptófano.
• Sal disódica de L-tirosina dihidratado.
• L-valina.
Vitaminas:
• Cloruro de colina.
• Pantotenato de D-calcio.
Componentes:
• Acido fólico.
• Niacinamida.
• Clorhidrato de piridoxina.
• Riboflavina.
• Clorhidrato de tiamina.
Sales inorgánicas:
• Cloruro de calcio (CaCl2) (anhidro).
• Sulfato de magnesio (MgSO4) (anhidro).
• Cloruro de potasio (KCl).
• Bicarbonato de sodio (NaHCO3).
• Cloruro de sodio (NaCl).
• Fosfato de sodio monobásico.
Otros componentes:
• D-glucosa (dextrosa).
• Rojo fenol.
• Piruvato de sodio.

CONTENIDO DEL ESTUCHE DE MEDIO MINIMO ESENCIAL

• Envase x 50 mL.
• Envase x 500 mL.
• Envase x 1L.

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS

• Mechero de Bunsen.
• Filtro de Jeringa. (0.2 μm).
• Elementos de protección.
• Frasco de vidrio.
• Vaso precipitado.
• Barra magnética.
• Jeringa de 20 mL (sin aguja).
• Tapones estériles.
• Agrafes estériles.
• Tapas Estériles.
• Guantes.
METODOLOGÍA:
Principio del método
El medio está destinado para el cultivo de células en procesos de investigación genética. Útil para células en crecimiento en monocapa, tales como fibroblastos.
Este medio es de uso corriente, contiene más aminoácidos y en mayor concentración que el BME (Medio Basal de Eagle). Se usa para casi todo tipo de cultivos celulares y requiere la adición de suero (10%).
Criterios de desempeño y limitaciones del método
Para uso en investigación genética.
Preparación de reactivos
El medio se encuentra listo para ser usado.
Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos
Almacenar a una temperatura entre 2°C a 8°C.
Espécimen o muestra
Investigación de células.
Procedimiento
1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero, y en una cabina de flujo laminar.

3. Usar instrumentos que garanticen la esterilidad del producto.

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO MINIMO ESENCIAL

o Interno
• Aspecto: Líquido.
• Color: Rojo/naranja traslúcido.
• pH final: 7.1 ± 0.2
• Prueba de esterilidad: Se realiza control de esterilidad sembrando
el medio mínimo esencial en agar sangre, incubar entre 72 a 120
horas a 37°C e incubar el producto terminado por 24 horas.

o Externo
• Prueba de efectividad: N/A

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL MEDIO MINIMO ESENCIAL

• Utilizar el producto antes de la fecha de expiración.
• Las extracciones frecuentes de pequeñas cantidades, pueden ocasionar
contaminaciones en el contenido.
• Use solo si la solución está clara.
• Para el manejo del producto, con agentes contaminantes utilizar la
indumentaria de protección adecuada.
• Mantener los recipientes abiertos el menor tiempo posible.
TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:
• Cabina de flujo laminar.
• Incubadora.
• Filtro de jeringa. (0.2 μm)
• Equipo de filtración. (0.65 -0.2 μm).
• Grafadora.
• Potenciómetro.
• Balanza.
BIBLIOGRAFÍA:
• Martínez, O. (14 de febrero de 2019). Universitat de Barcelona. Obtenido de
http://diposit.ub.edu/dspace/bitstream/2445/132266/1/190414-
GUION%20Y%20RUBRICA%20A%20A%20 DEPOSITAR.pdf

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