Agar Sangre Columbia

Descripción

Agar Sangre Columbia

APLICACIÓN Y USO DEL AGAR SANGRE COLUMBIA

Es un medio de cultivo que se usa principalmente en la microbiología clínica, debido a que sirve para el aislamiento de microorganismos no exigentes, visualizando también, diferentes reacciones de hemólisis.

 

COMPONENTES DEL AGAR SANGRE COLUMBIA

• Agar liofilizado.
• Digerido pancreático de caseína.
• Digerido péptico de carne.
• Extracto de levadura.
• Cloruro de Sodio.
• Digerido pancreático de corazón.
• Amidon de maíz.

 

CONTENIDO ESTUCHE DEL AGAR SANGRE COLUMBIA

• Unidad, paquete por 10 placas.

 

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:

• Mechero 
• Asas bacteriológicas.
• Elementos de protección.
• Incubadora entre 35-37°C.
• Guantes. 
• Cepas ATCC.

 

METODOLOGÍA:

• Principio del método:

El Agar Sangre Columbia tiene propiedades nutricionales que permiten mejores crecimientos, los cuales se derivan de la combinación de dos peptonas y del Extracto de Levadura como fuente de vitaminas del complejo B. 

Se incluye Almidón de maíz para absorber los derivados tóxicos contenidos en la muestra y sirven como fuente de energía para los microorganismos que poseen alfa-amilasas, aumenta el crecimiento de Neisseria spp, y mejora las reacciones hemolíticas de algunos estreptococos. 

La sangre de cordero permite detectar las reacciones hemolíticas y aporta el factor X necesario para el crecimiento de numerosas especies patógenas.

La mezcla de Peptona y Extracto de carne bovina, promueven el crecimiento de bacterias anaerobias al proporcionar nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos. El cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico del medio. 

 

• Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Aislamiento y cultivo de microorganismos exigentes y no exigentes provenientes de material clínico y no clínico.

 

• Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para ser usado.

 

• Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos:

El medio de cultivo debe ser conservado a una temperatura de 2-8°C, en su empaque original, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio.

Almacenar las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación caiga sobre la superficie del medio.

 

• Espécimen o muestra

Muestras clínicas, elementos producidos industrialmente como alimentos o investigativos.

 

• Procedimiento:

1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
3. Tener asa estéril para la toma de muestra.
4. Sembrar suavemente sobre la superficie del producto.
5. Incubar las placas a 35-37°C en posición invertida, 18-24-48-72-120 horas, según las técnicas implementadas por cada laboratorio.
6. Dependiendo de las exigencias del microorganismo almacenar en la atmósfera adecuada.
7. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

 

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:

 

CONTROL DE CALIDAD DEL AGAR SANGRE COLUMBIA

• • Prueba Macroscópica: 
    • Apariencia: Medio de cultivo semisólido de color rojo.

• pH final: 7.3 ± 0.2 (25°C).

• • Volumen: 19 mL ±.

• Prueba de esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35-37°C.
• Prueba de Efectividad: La efectividad del medio se controla mediante el cultivo se cultivan con el siguiente control ATCC:

 

 

Microorganismos	Cepa	Crecimiento
Escherichia coli	ATCC 25922	Satisfactorio
Staphylococcus aureus	ATCC 29213	Satisfactorio Beta hemolisis
Streptococcus pyogenes	ATCC 19615	Satisfactorio Beta hemolisis
Streptococcus pneumaniae	ATCC 6305	Satisfactorio Alfa hemolisis

 

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL AGAR SANGRE COLUMBIA✅

• Para uso de diagnóstico in vitro.
• Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
• Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas.
• El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución.

 

TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:

• APS One
• Càbina de flujo laminar
• Master Clave.
• Autoclave.
• Incubadora.

 

BIBLIOGRAFÍA:

• Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 11. Brun, S., et al. 2001. Evaluation of five commercial Sabouraud gentamicin-chloramphenicol agar media. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 20: 718-723. http://www.bd.com/ds/technicalCenter/inserts/Sabouraud_Media_Low%20pH.pdf
• Macfaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identificationmaintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore, Md.3. Waterworth and Pamela M., 1955, Brit. J. Exp. Pathol., 36:186.
• Hunter D. and Kearns M., 1977, Brit. Vet. J., 133:486.
• Snavely and Brahier, 1960, Am. J. Clin. Pathol., 33:511.
• Waterworth and Pamela M., 1955, Brit. J. Exp. Pathol., 36:186.
• Becton, Dickinson and Company. Section III Culture Medium and Ingredients Manual of Microbiological Culture Media. Pg 151 -153 Maryland 2003