Agar Sabouraud

Descripción

Agar Sabouraud

Aplicación y uso de Agar Sabouraud:

Medio no selectivo, para el cultivo y mantenimiento de hongos patógenos y no patógenos, en especial dermatofitos. 

 

COMPONENTES DEL AGAR SABOURAUD

• Dextrosa.
• Peptona Micológica.
• Agar liofilizado.

 

CONTENIDO ESTUCHE. PRESENTACIÓN DEL AGAR SABOURAUD

• Unidad. Paquete por 10 placas.

 

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:

• Mechero de Bunsen.
• Asas bacteriológicas.
• Elementos de protección.
• Incubadora a 35 – 37°C.
• Guantes. 
• Cepas ATCC.

 

METODOLOGÍA:

• Principio del método:

Medio de uso general para el cultivo de dermatofitos. Es utilizado para el aislamiento y cultivo de hongos. En el medio de cultivo, la peptona proporciona compuestos nitrogenados; la dextrosa proporciona fuente de energía; el alto contenido de glucosa, el pH ácido, inhibe el desarrollo bacteriano y favorecen el crecimiento de hongos y levaduras. Algunos hongos patógenos pueden producir esporas infecciosas que se dispersan fácilmente en el aire, por lo que el examen debe llevarse a cabo en cabina de seguridad. 

 

• Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Recuperación de hongos dermatofitos, inhibiendo la flora bacteriana.

 

• Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para ser usado.

 

• Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos:

El medio de cultivo debe ser conservado a una temperatura de 2-8°C, en su empaque original, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio.

Almacenar las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación caiga sobre la superficie del medio.

 

• Espécimen o muestra

Para cultivo selectivo y recuperación de hongos y levaduras, para uso clínico, industrial o investigativo. 

 

• Procedimiento:

1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
3. Tener asa estéril para la toma de muestra.
4. Sembrar suavemente sobre la superficie del producto.
5. Incubar las placas a 35 – 37°C en posición invertida, entre 18-24-48-72-120 horas, según las técnicas implementadas por cada laboratorio.
6. Dependiendo de las exigencias del microorganismo almacenar en la atmósfera adecuada.
7. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

 

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:

 

CONTROL DE CALIDAD DEL AGAR SABOURAUD

• Prueba Macroscópica: 

• Apariencia: Medio de cultivo semisólido de color beige.

• pH final: 5.6 ± 0.2 (25°C).

• Volumen: 19 mL ±.

• Prueba de esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35 – 37°C.
• Prueba de Efectividad: La efectividad del medio se controla mediante el cultivo se cultivan con el siguiente control ATCC: 

 

Microorganismos	Cepa	Crecimiento
Candida krusei	ATCC 14243	Satisfactorio. Colonia blanca
Candida albicans	ATCC 14053	Satisfactorio. Colonia blanca
Escherichia coli	ATCC 25922	Satisfactorio. Colonia blanca

 

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL AGAR SABOURAUD

• Para uso de diagnóstico in vitro.
• Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
• Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas.
• El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución.

 

TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:

• APS One.
• Cabina de flujo laminar.
• Master Clave  
• Autoclave.
• Cepario.
• Incubadora.

 

BIBLIOGRAFÍA:

• Kwon-Chung, K.J., and J.E. Bennett. 1992. Medical mycology. Lea & Febiger, Philadelphia. 10. Pfaller, M.A., and R.A. Fromtling (section ed.). 2003. Mycology. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.).
• Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 11. Brun, S., et al. 2001. Evaluation of five commercial Sabouraud gentamicin-chloramphenicol agar media. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 20: 718-723.  
• http://www.bd.com/ds/technicalCenter/inserts/Sabouraud_Media_Low%20pH.pdf
• Macfaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identificationmaintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore, Md.3. Waterworth and Pamela M., 1955, Brit. J. Exp. Pathol., 36:186.
• Becton, Dickinson and Company. Section III Culture Medium and Ingredients Manual of Microbiological Culture Media. Pg 151 -153 Maryland 2003.
• European Pharmacopoeia 6.0, volume 1. 2007. Microbiological Examination ofnon sterile products: Test for specified Microorganisms.
• http://www.labmedibac.com/wp-content/uploads/2015/04/AGAR-SABOURAUD-MEDIBAC-LAB.pdf
• Pharmacopée Européenne. EP 9.0. 2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.