Caldo Nutritivo

• • Peptona

• Extracto de carne.

• Digerido péptico de tejido animal

• Cloruro de Sodio

CONTENIDO ESTUCHE- PRESENTACIÓN:

• Tubo

• Frasco.

• Botella.

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:

• Indumentaria de trabajo.

• Mechero de Bunsen.
• Cabina de flujo laminar.
• Asas bacteriológicas estériles.
• Cepas ATCC.
• Equipos y material de Laboratorio.
• Medios de cultivo adicionales, según requerimiento.

METODOLOGÍA:

• Principio del método:

Medio formado por Peptona, Extracto de carne bovina y Agar. Esta fórmula proporciona los nutrientes necesarios para la multiplicación de un amplio número de microorganismos que no son necesariamente exigentes.

El extracto de carne bovina contiene sustancias solubles en agua incluidos los carbohidratos, vitaminas, compuestos de nitrógeno orgánicos y sales. Las peptonas son la fuente principal de nitrógeno orgánico, en particular aminoácidos y péptidos de cadena larga.

• Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Medio de cultivo líquido usado para el cultivo de bacterias no exigentes, en agua, alimentos y cosméticos, entre otros.

• Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para ser usado.

• Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos:

Una vez recibidos en el laboratorio, almacenar en lugar oscuro y seco a una temperatura de 2 a 8º C en su embalaje original hasta el momento de uso, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio. 

Antes de inocular los tubos deben estar a temperatura ambiente. 

• Espécimen o muestra:

Muestras de aguas, lácteos, cosméticos entre otros. Preparación de medios suplementados con otros nutrientes. Para uso clínico, industrial o investigativo. 

Procedimiento:

1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
3. Tener asa estéril para la toma de muestra.
4. Realizar el procedimiento según técnicas de cada laboratorio.
5. El tiempo, temperatura y condiciones de incubación dependen del microorganismo que se quiera recuperar. (Para uso general, inocular las muestras directamente en el medio e incubar los tubos durante máximo 7 días entre 35 – 37 °C.
6. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:

CONTROL DE CALIDAD

• Prueba Macroscópica: 

Apariencia: Líquido color amarillo.

pH final: 7.4 ± 0.2 (25°C).

Volumen: Según la presentación del envase.

• Prueba de Estabilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35 – 37°C.

• Prueba de Efectividad: La efectividad del medio se controla mediante el cultivo de cepas control ATCC de:

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS:

• Para uso de diagnóstico in vitro.
• Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
• Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas 
• El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución

TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:

• APS One.
• Cabina de flujo laminar.
• Master Clave y Autoclave.
• Balanza.

BIBLIOGRAFÍA:

• https://www.condalab.com/es/productos/microbiologia/condaprod/microbi ology/dehydratedculturemediaformicrobiology//show/Categoria/1216/
• https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a2844b4 9b1c6.pdf
• https://foodsafety.neogen.com/sp/nutrient-broth
• Horwitz, W. (ed.). 2000. Official methods of analysis of AOAC International, 17th ed, vol.1. AOAC International, Gaithersburg, MD. 5.
• Downes and Ito (ed.). 2001. Compendium of methods for the microbiological examination of foods, 4th ed. American Public Health Association, Washington, D.C.