Caldo BHI

Descripción

Caldo BHI

APLICACIÓN Y USO DEL CALDO BHI

El Medio Caldo BHI es un medio selectivo para uso general, adecuado para el cultivo de una gran variedad de microorganismos como bacterias, levaduras y hongos, a partir de muestras clínicas.

 

COMPONENTES DEL CALDO BHI

• Peptona
• Infusión cerebro vacuno
• Infusión corazón vacuno
• Dextrosa
• Cloruro de Sodio
• Fosfato disódico

 

CONTENIDO DEL ESTUCHE – PRESENTACIÓN DEL CALDO BHI

• Unidad. Caja por 10 tubos. 

 

MATERIALES ADICIONALES

• Indumentaria de trabajo 
• Mechero de Bunsen
• Cabina de flujo laminar 
• Asas bacteriológicas estériles
• Cepas ATCC
• Equipos y material de Laboratorio.
• Medios de cultivo adicionales, según requerimiento.

 

METODOLOGÍA

• Principio del método: 

Es un medio de cultivo que contiene infusiones de tejidos de cerebro y corazón para el suministro de proteínas y nutrientes para favorecer el crecimiento de microorganismos exigentes y no exigentes.

La infusión de cerebro de ternera, la infusión de corazón vacuno y la peptona, son la fuente de carbono, nitrógeno, y vitaminas. 

El medio es adecuado para el cultivo de un amplio número de microorganismos, incluso de patógenos. Esta base de cultivo puede ser enriquecida con sangre o agentes selectivos de crecimiento. 

El Medio de Cultivo B.H.I sin suplementar es un medio general de crecimiento para bacterias aeróbicas, y para siembras primarias de hongos y de Actinomycetales, de muestras clínicas y no clínicas.

Con el agregado de 20 Ul de Penicilina y 40 µg/ml de estreptomicina, se utiliza este medio para el aislamiento de hongos patógenos.

 

• Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Medio de cultivo líquido altamente nutritivo que permite la recuperación de toda clase de microorganismos. En su cultivo debe evitarse el crecimiento de flora acompañante.

 

• Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para su uso.

 

• Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos

Una vez recibidos en el laboratorio, almacenar en lugar oscuro y seco a una temperatura de 2 a 8ºC en su embalaje original hasta el momento de uso, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio. 

Antes de inocular los tubos deben estar a temperatura ambiente. 

 

• Espécimen o muestra

El medio puede ser utilizado para muestras clínicas, industriales o investigativas

 

• Procedimiento:

1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
3. Tener asa estéril para la toma de muestra
4. Realizar el procedimiento según técnicas de cada laboratorio
5. El tiempo, temperatura y condiciones de incubación dependen del microorganismo que se quiera recuperar. (Para uso general, inocular las muestras directamente en el medio e incubar los tubos durante máximo 7 días entre 35–37 °C.
6. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

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CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:

CONTROL DE CALIDAD DEL CALDO BHI

• Prueba Macroscópica: 

Apariencia: Líquido amarillo pálido.

pH final: 7.4 ± 0.2 (25°C).

Volumen: Según presentación comercial

 

• Prueba de esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35-37°C.

 

• Prueba de Efectividad: La efectividad del medio se controla mediante el cultivo se cultivan con el siguiente control ATCC:

 

Microorganismos	Cepa	Crecimiento
Candida albicans	ATCC 60193	Satisfactorio
Streptococcus pneumoniae	ATCC 6305	Satisfactorio
Shigella flexneri	ATCC 12022	Satisfactorio
Sin inocular	Control	Ámbar Claro

 

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL CALDO BHI

• Para uso de diagnóstico in vitro.
• Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
• Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas 
• El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución

 

TECNOLOGÍA Y EQUIPOS UTILIZADOS:

• Cabina de flujo laminar

• APS One 
• Master Clave
• Impresora Linx
• Cuarto frío

 

BIBLIOGRAFÍA:

• Flores, M., and D. Welch. 1992. Section 6. Mycology: culture media, p.6.7.1-6.7.3. In: H.D. Isenberg (ed.), Clinical microbiology procedures handbook, vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
• Sutton, D.A. 2003. Specimen collection, transport, and processing: mycology. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 
• Land, G. et al. 1991. Aerobic pathogenic Actinomycetales. In: A. Balows, W.J. Hausler, Jr., K.L. Herrmann, H.D. Isenberg, and H.J. Shadomy (ed.), Manual of clinical microbiology, 5th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
• Nash, P., and M.M. Krenz. 1991. Culture media, p. 1226-1288. In : A. Balows, W.J. Hausler, Jr., K.L. Herrmann, H.D. Isenberg, and H.J.