Agar Salmonella Shigella

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Agar Salmonella Shigella es un medio de cultivo selectivo y de diferenciación para el aislamiento de bacilos entéricos patógenos, en especial los pertenecientes al género Salmonella, a partir de muestras clínicas.

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Descripción

Agar Salmonella Shigella

Aplicación y uso de Agar Salmonella Shigella:

Es un medio de cultivo selectivo y de diferenciación para el aislamiento de bacilos entéricos patógenos, en especial los pertenecientes al género Salmonella, a partir de muestras clínicas. 

 

COMPONENTES DEL AGAR SALMONELLA SHIGELLA

  • Extracto de carne
  • Digerido péptico de tejido animal
  • Lactosa
  • Sales biliares 
  • Tiosulfato de Sodio
  • Citrato de Sodio
  • Citrato Férrico 
  • Verde Brillante
  • Rojo Neutro
  • Agar

 

CONTENIDO ESTUCHE DEL AGAR SALMONELLA SHIGELLA

  • Unidad. Paquete por 10 placas

 

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:

  • Mechero de Bunsen.
  • Asas bacteriológicas.
  • Elementos de protección.
  • Incubadora a 35 – 37°C.
  • Guantes. 
  • Cepas ATCC.

 

METODOLOGÍA:

  • Principio del método:

El Agar Salmonella es una modificación del agar citrato desoxicolato. Se le considera un medio moderadamente selectivo, según el nivel de inhibición de los microorganismos Gram positivos y Enterobacterias de diferentes géneros de Salmonella y Shigella, que inhibe por el contenido de sales biliares y el verde brillante.

Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa, y a la formación de ácido sulfhídrico a partir del Tiosulfato de Sodio.

Las colonias fermentadoras de lactosa producirán ácidos y cambiará el color del medio a rosa. Como Shigella y Salmonella no utilizan este azúcar forman colonias transparentes.

La producción de ácido sulfhídrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formación de sulfuro de hierro. 

 

  • Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Medio de cultivo selectivo y diferencial para Salmonella y Shigella.

 

  • Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para ser usado.

 

  • Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos:

El medio de cultivo debe ser conservado a una temperatura de 2-8°C, en su empaque original, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio.

Almacenar las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación caiga sobre la superficie del medio.

 

  • Espécimen o muestra:

Utilizado para presencia en heces y alimentos, para muestras clínicas, de investigación o industriales.

 

  • Procedimiento:
  1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
  2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
  3. Tener asa estéril para la toma de muestra.
  4. Sembrar suavemente sobre la superficie del producto.
  5. Incubar las placas entre 35 – 37°C en posición invertida, por 18-24-48-72-120 horas, según las técnicas implementadas por cada laboratorio.
  6. Dependiendo de las exigencias del microorganismo almacenar en la atmósfera adecuada.
  7. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

 

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:

 

CONTROL DE CALIDAD DEL AGAR SALMONELLA SHIGELLA

  • Prueba Macroscópica: 
  • Apariencia: Medio de cultivo semisólido de color rojizo pálido.
  • pH final: 7.0 ± 0.2 (25°C).
  • Volumen: 19 mL ±.
  • Prueba de esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35 – 37°C.
  • Prueba de Efectividad: La efectividad del medio se controla mediante el cultivo de cepas control ATCC de:

 

Microorganismos Cepa Crecimiento
Salmonella enteritidis ATCC 13076 Crecimiento colonia con centro blanco
Shigella flexneri  ATCC 12022 Crecimiento colonia rosa 
Escherichia coli ATCC 25922 Crecimiento colonia rosáceas 

 

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL AGAR SALMONELLA SHIGELLA

  • Para uso de diagnóstico in vitro.
  • Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
  • Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas.
  • El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución.

 

TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:

  • APS One.
  • Cabina de flujo laminar.
  • Master Clave.
  • Incubadora.
  • Autoclave.

 

BIBLIOGRAFÍA:

  • Club de Informática Médica y Telemedicina (Universidad de Panamá). Medio de Agar SS. Telmeds.org [publicada en línea]. 2009(10). [citado 21 de Oct de 2013]. Disponible. 
  • Macfaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of-medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore, Md.
  • Becton, Dickinson and Company. Section III Culture Medium and Ingredients   Manual of Microbiological Culture Media. Pg 151 -153 Maryland 2003.
  • European Pharmacopoeia 6.0, volume 1. 2007. Microbiological Examination of non-sterile products: Test for specified Microorganisms.
  • The United States Pharmacopoeia, 2006, USP29/NF24, The United States Pharmacopeial Convention. Rockville, MD. 

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