Agar Saboraud con Cloranfenicol

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Agar Saboraud con Chloramphenicol es recomendado para el aislamiento selectivo de levaduras y hongos filamentosos (Dermatophytes y otros hongos) de muestras biológicas que presentan flora mixta fúngica y bacteriana.

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Descripción

Agar Saboraud con Cloranfenicol

Aplicación y uso de Agar Saboraud con Cloranfenicol:

El medio de cultivo con Chloramphenicol es recomendado para el aislamiento selectivo de levaduras y hongos filamentosos (Dermatophytes y otros hongos) de muestras biológicas que presentan flora mixta fúngica y bacteriana.

 

COMPONENTES DEL AGAR SABORAUD CON CLORANFENICOL

  • Cloranfenicol
  • Peptona Micológica
  • Agar liofilizado
  • Dextrosa 

 

CONTENIDO ESTUCHE-PRESENTACIÓN DEL AGAR SABORAUD CON CLORANFENICOL

  • Unidad, paquete por 10 placas.

 

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:

  • Mechero de Bunsen.
  • Asas bacteriológicas
  • Elementos de protección
  • Incubadora a 37°C
  • Guantes. 
  • Cepas ATCC

 

METODOLOGÍA:

  • Principio del método:

El medio de cultivo al contener Cloranfenicol, un antibiótico estable al calor, de amplio espectro, inhibe el crecimiento de la flora bacteriana asociada de un amplio rango de bacterias Gram positivas y Gram negativas y permite el crecimiento selectivo de hongos patógenos. 

La presencia de Gentamicina (Amino glucósido) proporciona unas inhibiciones bacterianas más selectivas. El Sabouraud con Cloranfenicol y Cicloheximida, es un medio muy selectivo donde se inhiben crecimientos de hongos saprofitos y levaduras, favoreciendo el aislamiento de dermatofitos. 

Las peptonas y la glucosa del medio Sabouraud promueven el crecimiento de hongos.

 

  • Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Recuperación de hongos dermatofitos, inhibiendo la flora bacteriana.

 

  • Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para ser usado.

 

  • Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos:

El medio de cultivo debe ser conservado a una temperatura de 2-8°C, en su empaque original, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio.

Almacenar las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación caiga sobre la superficie del medio.

 

  • Espécimen o muestra:

Para cultivo selectivo y aislamiento de hongos y levaduras. Se recomienda este medio para el cultivo de muestras biológicas que presentan una flora bacteriana que es abundante en esputos, heces, uñas y pelo. Para uso clínico, industrial o investigativo.

 

  • Procedimiento:
  1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
  2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
  3. Tener asa estéril para la toma de muestra.
  4. Sembrar suavemente sobre la superficie del producto.
  5. Incubar las placas a 20-25°C (o según técnica de cada laboratorio)  en posición invertida, 18-24-48-72-120 horas, según las técnicas implementadas por cada laboratorio.
  6. Dependiendo de las exigencias del microorganismo almacenar en la atmósfera adecuada.
  7. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

 

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS DEL AGAR SABORAUD CON CLORANFENICOL

 

  • Prueba Macroscópica: 
    • Apariencia: Medio de cultivo semisólido de color amarillo.
  • pH final: 5.6 ± 0.2 (25°C).
  • Volumen: 19 mL ±.
  • Prueba de esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35-37°C.
  • Prueba de Efectividad: La efectividad del medio se controla mediante el cultivo se cultivan con el siguiente control ATCC:

 

 

Microorganismos Cepa Crecimiento
Candida albicans ATCC 14243 Satisfactorio. Colonia blanca
Candida krusei  ATCC 14053 Satisfactorio. Colonia blanca
Escherichia Coli ATCC 25922 Satisfactorio. Colonia blanca

 

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL AGAR SABORAUD CON CLORANFENICOL

  • Para uso de diagnóstico in vitro.
  • Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
  • Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas 
  • El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución

 

TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:

  • APS One.
  • Càbina de flujo laminar.
  • Master Clave.  
  • Autoclave.
  • Cepario.
  • Incubadora.

 

BIBLIOGRAFÍA:

  • Kwon-Chung, K.J., and J.E. Bennett. 1992. Medical mycology. Lea & Febiger, Philadelphia. 10. Pfaller, M.A., and R.A. Fromtling (section ed.). 2003. Mycology. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.).
  • Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 11. Brun, S., et al. 2001. Evaluation of five commercial Sabouraud gentamicin-chloramphenicol agar media. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 20: 718-723.  
  • http://www.bd.com/ds/technicalCenter/inserts/Sabouraud_Media_Low%20pH.pdf
  • Macfaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identificationmaintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore, Md.3. Waterworth and Pamela M., 1955, Brit. J. Exp. Pathol., 36:186.
  • Becton, Dickinson and Company. Section III Culture Medium and Ingredients Manual of Microbiological Culture Media. Pg 151 -153 Maryland 2003.
  • European Pharmacopoeia 6.0, volume 1. 2007. Microbiological Examination ofnon sterile products: Test for specified Microorganisms.
  • http://www.labmedibac.com/wp-content/uploads/2015/04/AGAR-SABOURAUD-MEDIBAC-LAB.pdf
  • Pharmacopée Européenne. EP 9.0. 2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

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