Agar Mac Conkey con Sorbitol

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$ 49.800 + IVA

El Agar MacConkey con Sorbitol es un medio de diferenciación parcialmente selectivo para el aislamiento de E. coli O157:H7 a partir de heces, muestras clínicas, veterinaria y medioambientales. Es útil para el aislamiento e identificación de la bacteria Klebsiella pneumoniae, en este medio se identifica con colonias rosadas mucoides.

Descripción

Agar MacConkey con Sorbitol

APLICACIÓN Y USO DEL AGAR MAC CONKEY CON SORBITOL

Medio de diferenciación parcialmente selectivo para el aislamiento de E. coli O157:H7 a partir de heces, muestras clínicas, veterinarias y medioambientales.

Es un medio de cultivo selectivo que se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, los cuales a partir de muestras clínicas, permiten la diferenciación sobre la base de la fermentación de la lactosa. El medio de cultivo Mac Conkey es útil para el aislamiento e identificación de la bacteria Klebsiella pneumoniae, la cual es lactosa positiva y en este medio se identifica con colonias rosadas mucoides.

 

COMPONENTES DEL AGAR MAC CONKEY CON SORBITOL

  • Hidrolizado enzimático de Caseína.
  • Agar liofilizado.
  • D-Sorbitol.
  • Peptona de carne.
  • Mezcla de sales biliares.
  • Rojo neutro.
  • Cristal Violeta.

 

CONTENIDO ESTUCHE- PRESENTACIÓN DEL AGAR MAC CONKEY CON SORBITOL

  • Unidad. Paquete por 10 placas. 

 

MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS:

  • Mechero de Bunsen.
  • Asas bacteriológicas
  • Elementos de protección
  • Incubadora a 35-37°C
  • Guantes. 
  • Cepas ATCC

 

METODOLOGÍA:

  • Principio del método:

La Escherichia Coli O157:H7, es el agente causal del síndrome urémico hemolítico. Fermenta la lactosa como todas las cepas de Escherichia coli, pero a diferencia de estas, no fermentan el sorbitol.

Los microorganismos fermentadores de sorbitol crecen observándose como colonias rosadas-rojizas, ya que por la fermentación del sorbitol disminuye el pH alrededor de la colonia, produciendo un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias y la precipitación de las sales biliares. 

Los microorganismos no fermentadores de sorbitol se desarrollan y se observan como colonias incoloras.

 

  • Criterios de desempeño y limitaciones del método:

Dado que existen otros microorganismos Gram negativos no fermentadores de sorbitol, es necesario realizar pruebas bioquímicas de identificación bacteriana.

 

  • Preparación de reactivos:

El medio se encuentra listo para ser usado.

 

  • Condiciones de almacenamiento y estabilidad de los reactivos:

El medio de cultivo debe ser conservado a una temperatura de 2-8°C, en su empaque original, evitando la exposición a la luz directa, no debe ser congelado con el fin de preservar el medio.

Almacenar las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación caiga sobre la superficie del medio.

 

  • Espécimen o muestra:

Todo tipo de muestras clínicas, alimentos, productos farmacéuticos y muestras de agua; para uso clínico, industrial o investigativo.

 

  • Procedimiento:
  1. Contar con un lugar que tenga normas de asepsia estrictas.
  2. Para contar con una técnica estéril, realizar todo el procedimiento junto a la llama del mechero y/o en una cabina de flujo laminar.
  3. Tener asa estéril para la toma de muestra.
  4. Sembrar suavemente sobre la superficie del producto.
  5. Incubar las placas a 35-37°C en posición invertida, entre 18-24-48-72-120 horas, según las técnicas implementadas por cada laboratorio.
  6. Dependiendo de las exigencias del microorganismo almacenar en la atmósfera adecuada.
  7. Luego de la incubación, observar el cultivo, según las características de las colonias determinar los posteriores estudios.

 

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ANALÍTICOS:

 

CONTROL DE CALIDAD DEL AGAR MAC CONKEY CON SORBITOL

  • Prueba Macroscópica: 
  • Apariencia: Medio de cultivo semisólido de color rojizo.  
  • pH final: 7.1 ± 0.2 (25°C).
  • Volumen: 19 mL ±.
  • Prueba De Esterilidad: Se realiza una prueba de esterilidad sometiendo un número representativo del lote a incubación entre 24 y 120 horas, a 35-37°C.
  • Prueba De Efectividad: La efectividad del medio se controla mediante el cultivo de cepas control ATCC de:

 

Microorganismos Cepa Crecimiento
Escherichia coli.O157:H7 NCTC 12900 Satisfactorio (colonias incoloras o beige)
Escherichia coli ATCC 25922 De rosa a rosado
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inhibición        de  parcial  a  completa

 

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DEL AGAR MAC CONKEY CON SORBITOL

  • Para uso de diagnóstico in vitro.
  • Utilizar el medio de cultivo antes de la fecha de expiración.
  • Usar elementos de protección personal durante el uso del producto por la exposición a muestras potencialmente peligrosas.
  • El desecho del medio de cultivo se debe realizar, según los protocolos implementados por cada institución.

 

TECNOLOGÍA – EQUIPO UTILIZADO:

  • APS One.
  • Càbina de flujo laminar.
  • Master Clave.
  • Autoclave.

 

BIBLIOGRAFÍA:

  • Hunter D. and Kearns M., 1977, Brit. Vet. J., 133:486.
  • Waterworth and Pamela M., 1955, Brit. J. Exp. Pathol., 36:186.
  • Bekton, Dickinson and Company. Section III Culture Medium and
  • Ingredients Manual of Microbiological Culture Media. Pg 151 -153 Maryland 2003.
  • Kaper, J.B., O’Brien, A.D. (eds.). 1998: Escherichia coli O157:H7 and Other Shiga Toxin Producing E. coli strains. American Society for Microbiology, Washington, DC, USA.

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